Genta REV M ревертаза (обратная транскриптаза) — генетически модифицированная обратная транскриптаза вируса мышиной лейкемии Молони (MMLV), предназначенная для синтеза комплементарной цепи ДНК (кДНК) на матрице одноцепочечной РНК. Genta REV M выделена из штамма Escherichia coli, экспрессирующего модифицированный ген обратной транскриптазы MMLV.
По сравнению с обратной транскриптазой «дикого типа» Genta REV M ревертаза обладает повышенной термостабильностью: оптимальная температура для работы фермента — 50 °С, фермент сохраняет активность при температуре до 65 °С. Обратная транскриптаза Genta REV M ревертаза обеспечивает более высокий выход кДНК, позволяет синтезировать более длинные фрагменты, имеет улучшенную эффективность при использовании GC-богатых РНК-матриц, а также имеет более высокую продуктивность.
Обратная транскриптаза Genta REV M ревертаза подходит для ОТ-ПЦР в формате «one-step».
Genta REV М Ревертаза,
100 000 ед./мл – 0,1 мл
Буфер Genta-B 2– 1,25 мл
Genta REV М Ревертаза,
100 000 ед./мл. - ХХХ мл
* без буфера
(при заказе от 1 мл)
Genta REV М Ревертаза,
100 000 ед./мл – 5 х 0,1 мл
Буфер Genta-B 2 – 5 х 1,25 мл
-
(под заказ)*
-
10 000 ед.
-
50 000 ед.
-
-
- Артикул
- RP-E-005-Custom
-
(под заказ)*
-
10 000 ед.
-
50 000 ед.
-
-
- Артикул
- RP-E-005-Custom
- Информация о продукции
Концентрация: 100 000 ед/мл
Область применения:
- Синтез кДНК
- Одностадийная ОТ-ПЦР
- Приготовление библиотек ДНК
- Вставка меченых нуклеотидов в кДНК
Основные свойства:
- Оптимальная температура активности фермента — 50 °С
- Высокий выход кДНК
- Синтез длинных кДНК
- Улучшенная эффективность при использовании GC-богатых РНК-матриц
- Техническая документация
Чувствительность ревертазы к мРНК GAPDH, TP53 и CDK9
Была проведена обратная транскрипция с использованием рандомных праймеров c ревертазой Genta REV M (10 единиц) и ревертазами других производиетелей в соответствии с инструкциями к каждому ферменту на разных количествах тотальной РНК, выделенной из клеточной линии HEK293. Методом ПЦР-РВ оценивали выход кДНК трёх транскриптов разной представленности в клетках: (A) GAPDH – высоко представленный, (Б) TP53 – умеренно представленный, (В) CDK9 – низко представленный.
На графиках представлены значения Ct. Статистическая значимость: *** - p<0,001; ** - p<0,01; * - p<0,05.
Чувствительность ревертазы Genta REV M к ингибированию этанолом.
Была проведена обратная транскрипция тотальной РНК из клеточной линии HEK293 с использованием срандомных праймеров c ревертазой Genta REV M (10 единиц). Обратная транскрипция проводилась в отсутствие и в присутствии 5%, 10% и 20% этанола. кДНК анализировали с помощью ПЦР-РВ.
Данные Сt были нормированы на контроль без этанола.
Статистическая значимость: * - p<0,05.
- Другие характеристики
Буфер для хранения: 20 мM Трис-HCl (рН 7.5 при 25 °С); 200 мM NaCl; 0.1 мМ ЭДТА; 1 мМ ДТТ; 0,01% Igepal CA-630; 50% глицерин.
Температура хранения: -20 °С.
Условия транспортировки: в термоконтейнере с хладоэлементами, при температуре от 2 °С до 8 °С не более 7 суток.
Срок хранения при соблюдении условий хранения и транспортировки: 24 месяца с момента производства.