Набор реагентов для синтеза первой цепи кДНК Genta-RT kit

Genta-RT kit представляет собой набор реагентов для проведения синтеза первой цепи кДНК на матрице РНК. Набор включает в себя: in silico модифицированный гомолог обратной транскриптазы вируса лейкемии мышей Молони (MMLV) – Genta REV M ревертазу; Олиго(dT)₁₈ праймер; воду для ПЦР и 2 вида 5-кратного реакционного буфера (включающего в себя дНТФ и ДТТ):

5х Genta ОТ-буфер R – наличие Random-праймеров в реакционном буфере позволяет проводить синтез тотальной кДНК.

5х Genta ОТ-буфер – требуется добавление специфических праймеров для синтеза целевого фрагмента кДНК; или добавление Олиго(dT)₁₈ праймера для полиаденилированной РНК.

В состав набора входит генетически модифицированная обратная транскриптаза вируса мышиной лейкемии Молони (MMLV), которая по сравнению с обратной транскриптазой «дикого типа» обладает повышенной термостабильностью: оптимальная температура для работы фермента — 50 °С, фермент сохраняет активность при температуре до 65 °С. Термическая инактивация фермента происходит при прогревании фермента до 85 °С в течение 20 минут.

Обратная транскрипция набором Genta-RT и Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit от Thermo Fisher Scientific с последующим ПЦР-РВ с SYBR Green для гена CDK9.